Potencial antidiabético y efecto citotóxico in vitro de hidrolizados proteínicos y fracciones peptídicas ultrafiltradas obtenidos de Phaseolus lunatus L. y Vigna unguiculata L.

Abstract

México es uno de los países con más alta prevalencia de Diabetes Mellitus tipo 2 (DMT2) y actualmente es la segunda causa de muerte. En busca de alternativas alimentarias que contribuyan a su tratamiento, en este trabajo se investigó el potencial antidiabético de los hidrolizados de proteína y sus fracciones peptídicas ultrafiltradas de Phaseolus lunatus L. y Vigna unguiculata L. Se evaluó su grado de hidrólisis y la actividad inhibitoria in vitro sobre las enzimas α-amilasa, α-glucosidasa y DPP-IV (dipeptidil peptidasa IV) relacionadas con el metabolismo de los carbohidratos. Sobre su inocuidad como posibles ingredientes alimentarios, se evaluó su citotoxicidad en células sanas Vero. Las harinas obtenidas de los granos de frijol se suspendieron en solución alcalina precipitando la proteína en su punto isoeléctrico. El concentrado proteínico se hidrolizó durante 90 min con un sistema de enzimas pepsina-pancreatina (P-P) o alcalasa-flavourzima (A-F). La proteína soluble de cada hidrolizado se ulltrafiltró, obteniéndose cinco fracciones peptídicas (F) de tamaño >10, 5-10, 3-5, 1-3, <1 kDa. Las actividades inhibitorias sobre las enzimas α-amilasa y α-glucosidasa se evaluaron midiendo la liberación de azúcares reductores y de p-nitrofenol a 540 nm y 340 nm respectivamente, y sobre la DPP-IV, el compuesto 4-metil-coumaril-7-amida a λex = 360/λem = 460 nm. El perfil de aminoácidos se realizó por HPLC (High Pressure Liquid Chromatography). La citotoxicidad se evaluó por el método de sulforrodamina. Se encontró que la F >10 obtenida a partir del hidrolizado de V. unguiculata, generado con el sistema A-F, tuvo la mayor actividad inhibitoria sobre las enzimas α-amilasa y α-glucosidasa (IC50= 31.58 e IC50=0.633 mg proteína/ml respectivamente). Y la fracción F 5-10 obtenida del hidrolizado de P. lunatus, generado con el sistema A-F, sobre la DDP-IV (IC50=1.93 mg proteína/ml). El aminoácido leucina se encontró en cantidades importantes en las fracciones peptídicas con mayor actividad inhibitoria. Ninguna de las fracciones ultrafiltradas tuvo actividad citotóxica sobre la viabilidad de la línea celular. La F >10 de V. unguiculata A-F y F 5-10 de P. lunatus A-F representan componentes de estudio con potencial antidiabético para integrarlos en alimentos funcionales destinados a pacientes con DMT2, una vez que se tenga evidencia científica in vivo.