Aislamiento y purificación de péptidos de M. pruriens con potencial inhibidor de la enzima convertidora de angiotensina

Abstract

Las enfermedades cardiovasculares son la primera causa de muerte en todo el mundo. El principal factor de riesgo es la Hipertensión Arterial (HTA). Así, la prevención y el control son de vital importancia. Por lo anterior, el objetivo fue evaluar la actividad inhibitoria de la Enzima Convertidora de Angiotensina (ECA) de derivados proteínicos de M. pruriens aislados y purificados. Brevemente, se hidrolizó secuencialmente el concentrado proteínico de M. pruriens con Pepsina����Pancreatina; se determinó el grado de hidrólisis (GH) y, se fraccionó por ultrafiltración. Posteriormente, se determinó el porcentaje de inhibición de la ECA de las fracciones ultrafiltradas, se seleccionó la fracción más activa. Se determinó su perfil por cromatografía liquida de alta resolución (CLAR), se prefraccionó la fracción de 1-3kDa (F2) por extracción en fase solida C18 fase reversa, se registró la fracción de 1-3 kDa elución Agua/Acetonitrilo 90-10 (F2_2) con mayor actividad. Se separó, mediante CLAR semipreparativa obteniendo tiempos de retención (tR) de: 6 a 12min (F2_2_1); de 12 a 14min (F2_2_2) y de 14 a 25min (F2_2_3). La fracción F2_2_2 se seleccionó debido a su complejidad y actividad biológica. Posteriormente, se realizó la exclusión molecular y determinación del peso molecular empleando filtración en gel. Se realizó el IC50 de la fracción y se comparó con el captopril y lisinopril. Se logró recuperar el 71.29% de proteína en base seca, el GH fue de 34.85%, por lo que se clasifica como extensivo. La fracción final F2_2_2 (2.499mg/mL) aislada y purificada con tR: 16.25±1.48 registró el 48.57%±0.26 de porcentaje inhibición de la ECA, IC50 de 713.578����g/mL±1.09 y peso molecular de 1.394 kDa. En conclusión la actividad inhibitoria de la ECA existente de las fracciones aisladas y purificadas de M. pruriens son una alternativa para el diseño de nuevas herramientas terapéuticas para la prevención y tratamiento de la HTA.